一文搞定CHO稳转细胞株构建

CHO细胞株是工业生产中最常用的哺乳动物细胞株之一，但是构建一个稳定的CHO细胞株却是一件比较困难的任务。本文将介绍一种简单的方法，通过一篇文章即可搞定CHO稳转细胞株构建。

首先，为了构建CHO稳转细胞株，我们需要选择一个适合的载体。在本文中，我们选择了pCDNA3.1(+)载体，这个载体是一种广泛应用的哺乳动物表达载体，具有高转染效率和高表达水平的特点。

其次，我们需要选择一个适合的转染试剂。在本文中，我们选择了常用的Lipofectamine 3000试剂，这个试剂具有高效的转染效果和低细胞毒性。

接下来，我们需要将目标基因克隆到pCDNA3.1(+)载体中，构建表达载体。在克隆过程中，我们需要注意选择正确的限制酶和正确的克隆方向，以确保目标基因可以被正确表达。

一旦我们成功构建了表达载体，我们可以使用Lipofectamine 3000试剂将其转染到CHO细胞中。在转染过程中，我们需要注意控制转染试剂和载体的浓度，并选择适当的转染时间和培养条件。

最后，我们需要筛选稳定的CHO细胞株。在本文中，我们选择了G418抗性筛选法。我们将G418抗性基因克隆到pCDNA3.1(+)载体中，转染到CHO细胞中后，使用G418抗性选择试剂筛选稳定的CHO细胞株。

综上所述，通过选择适合的载体和转染试剂，正确克隆基因并控制转染条件，最后使用抗性筛选法，我们可以成功构建CHO稳转细胞株。通过本文的介绍，我们相信读者可以轻松地完成这个任务。